Шпаргалка Шпаргалка по микробиологии 169 Кб 1.Значение мед. В деятельности врача. Достижения микробиологии, вирусологии, и иммунологии в развитии медицины и задачи в современных условиях.

1. Лекции По Ветеринарной Вирусологии
2. Шпаргалки По Ветеринарной Вирусологии
3. Шпоры По Ветеринарной Вирусологии

Микроорганизмы являются возбудителями инфекционных болезней, которые часто встречаются в практике врача. Для того чтобы правильно поставить диагноз инфекционного заболевания, необходимо хорошо знать морфологию микробов, их основные формы, уметь различать их под микроскопом. Каждый врач должен владеть методом микроскопии, для чего необходимо знать устройство микроскопа и правила работы с ним. МИКРОБИОЛОГИЯ(греч.mikros — малый, лат.bios — жизнь) — наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, названные микроорганизмами, или микробами, их биологические признаки, систематика, экология, взаимоотношения с другими организмами, населяющими нашу планету, - животными, растениями и человеком.

МИКРОБИОЛОГИЯ — наука, которая изучает микробы во всем многообразии их отношений с организмом человека. В процессе развития микробиологии были разработаны оригинальные методы исследования, многие заимствованы из других дисциплин — биофизики, биохимии, генетики, цитологии и т.д. За всю историю своего развития перед микробиологией так же, как и другими естественными науками, стояли определенные цели и задачи, успешное развитие которых способствовало научному и общественному прогрессу всего человечества. Это в свою очередь стимулировало развитие специализированных РАЗДЕЛЫ микробиологии: общая, техническая, с х, ветеринарная, медицинская, санитарная, морская, космическая микробиология.

Лекции По Ветеринарной Вирусологии

ОБЩАЯ микробиология изучает наиболее общие закономерности, свойственные каждой группе перечисленных микроорганизмов: структуру, метаболизм, генетику, экологию и т.д. Основной задачей ТЕХНИЧЕСКОЙ (промышленной) микробиологииявляется разработка биотехнологии синтеза микроорганизмами биологически активных веществ: белков, витаминов, ферметов, спиртов, органических кислот, антибиотиков и др. СЕЛЬСКО ХОЗЯЙСТВЕННАЯ микробиология занимается изучением микроорганизмов, которые участвуют в круговороте веществ, используются для изготовления удобрений, вызывают заболевания растений, и другими проблемами. ВЕТЕРИНАРНАЯ микробиология изучает возбудителей заболеваний животных, разрабатывает методы их биологической диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения, направленного на уничтожение микробов-возбудителей в организме больного животного.

• Шпаргалка по общей ветеринарной хирургии Подробная шпора, которая больше подойдет.
• Название: Реферат по ветеринарной вирусологии - Принципы диагностики вирусных болезней.
• Предмет и задачи общей и частной ветеринарной. Русский Шпаргалки. По вирусологии.

Предметом изучения МЕДИЦИНСКОЙ микробиологииявляются болезнетворные (патогенные) и условно-патогенные для человека микроорганизмы, а также разработка методов микробиологической диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения вызываемых ими инфекционных заболеваний. Однако с медицинской микробиологией сформировалась иммунология, которая занимается изучением специфических механизмов защиты организмов людей и животных от болезнетворных микроорганизмов и другими проблемами.

Предметом изучения САНИТАРНОЙ микробиологии, тесно связанной с медицинской и ветеринарной микрбиологией, является санитарно-микробиологическое состояние объектов окружающей среды, пищевых продуктов и напитков. Морская и космическая микробиологияизучает соответственно микрофлору морей и водоемов и космического пространства и других планет. Изобретение микроскопа и открытие микробов (А.Левенгук).

02 апреля 2015 года студенты первого курса факультета ветеринарной.

Основные этапы развития микробиологии и их характеристика.Для микробиологических исследований используют несколько типов микроскопов (биологический, люминесцентный, электронный) и специальные методы микроскопии (фазово-контрастный, темнопольный). Предельная разрешающая способность иммерсионного микроскопа 0,2 мкм. Общее увеличение микроскопа определяется произведением увеличения объектива на увеличение окуляра.

ТЕМНОПОЛЬНАЯ МИКРОСКОПИЯ. Микроскопия в темном поле зрения основана на явлении дифракции света при сильном боковом освещении взвешенных в жидкости мельчайших частиц (эффект Тиндаля). Эффект достигается с помощью параболоид- или кардиоид-конденсора, которые заменяют обычный конденсор в биологическом микроскопе. ФАЗОВО-КОНТРАСТНАЯ МИКРОСКОПИЯ. Фазово-контрастное приспособление дает возможность увидеть в микроскоп прозрачные объекты. Они приобретают высокую контрастность изображения, которая может быть позитивной или негативной.

Позитивным фазовым контрастом называют темное изображение объекта в светлом поле зрения, негативным — светлое изображение объекта на темном фоне. ЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ (ИЛИ ФЛЮОРЕСЦЕНТНАЯ) МИКРОСКОПИЯ. Основана на явлении фотолюминесценции. Люминесценция — свечение веществ, возникающее после воздействия на них каких-либо источников энергии: световых, электронных лучей, ионизирующего излучения. Фотолюминесценция — люминесценция объекта под влиянием света. Если освещать люминесцирующий объект синим светом, то он испускает лучи красного, оранжевого, желтого или зеленого цвета.

В результате возникает цветное изображение объекта. Первичная (собственная) люминесценция наблюдается без предварительного окрашивания объекта, вторичная (наведенная) — возникает после обработки препаратов специальными люминесцирующими красителями — флюорохромами. Люминесцентная микроскопия по сравнению с обычными методами обладает рядом преимуществ: возможностью исследовать живые микроорганизмы и обнаруживать их в исследуемом материале в небольших концентрациях вследствие высокой степени контрастности. ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ. Позволяет наблюдать объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности светового микроскопа (0,2 мкм). Электронный микроскоп применяется для изучения вирусов, тонкого строения различных микроорганизмов, макромолекулярных структур и других субмикроскопических объектов.Световые лучи в таких микроскопах заменяют поток электронов, имеющий при определенных ускорениях длину волны около 0,005 нм, т.е.

Почти в 100000 раз меньше длины волны видимого света. Открытие мира м.о. Произошло в XVII. Первооткрывателем микробов явился АНТОНИЙ ЛЕВЕНГУК (1632 — 1723), купец по профессии, который стал крупнейшим натуралистом своего времени. Овладев искусством шлифования стекол, он изготовил линзы, которые давали большие увеличения. С их помощью Левенгук обнаружил мельчайших «живых зверьков» animalculae vivae в дождевой воде, зубном налете, загнившем мясе и других предметах. Свои наблюдения он обобщил в книге «Тайны природы, открытые А.

Он создал микроскоп и первые рисунки бактерий из зубного налета (1676 г.) ПЕРИОДЫ РАЗВИТИЯ микробиологии: Эвристический, морфологический, физиологический, иммунологический, современный (молекулярно-генетический) Исторические периоды: 1. Начальный период, который охватывает период второй половины XVIII. середины XIX. Он связан с созданием А.Левенгуком простейшего микроскопа и открытием микроскопических существ, не видимых глазом человека. Пастеровский период (вторая половина XIX в.), связанный с именем Луи Пастера, характеризуется становлением и развитием микробиологии и иммунологии как самостоятельной единой естественнонаучной дисциплины, имеющей свои объекты и оригинальные методы их исследования.

Третий период, охватывающий первую половину XX в., характеризуется дальнейшим развитием микробиологии и иммунологии и становлением вирусологии — науки о вирусах, особой форме живой материи. Современный период, начало которому было положено в середине текущего столетия научно-технической революцией в естествознании. Луи Пастер, его открытия в области микробиологии. болезнь пива и вина 1857 г.

брожение 1860 г. самопроизвольное зарождение 1868 г. болезнь шелковичных червей 1880-1885 гг. метод приготовления вакцин 1885 г. вакцинация против бешенства Развивающаяся винодельческая промышленность Франции и других стран требовала решения ряда биотехнологических вопросов.

В частности, выяснения и устранения причин скисания вина. Люди в течение двух тысячелетий получили виноградное вино с помощью спиртового брожения.

Однако его природа оставалась загадкой. В области медицины также назрела необходимость установления причин нагноения ран и природы заразных заболеваний. История терпеливо ждала своего гниения, которым оказался молодой французский химик ЛУИ ПАСТЕР ( 1822 — 1895). Л.Пастер экспериментально доказал, что спиртовое брожение вызывается определенными видами микроорганизмов, а скисание вина связано с попаданием в виноградный сок посторонних видов, вызывающих уксусное брожение. Для борьбы с ним он предложил метод термической обработки виноградного сока. Полученные данные позволили Пастеру допустить, что инфекционные болезни человека представляют по сути «брожение соков организма», вызванное определенными микроорганизмами.

Они же являются виновниками гнойных послеоперационных осложнений. Работая с микроорганизмами — возбудителями куриной холеры, он получил культуры, потерявшие болезнетворные свойства. Прививка здоровым птицам такового штамма предохраняла их от последующего заражения болезнетворными возбудителями. Пастер назвал данный метод вакцинацией в честь Э.Дженнера, который еще в 1791 г.

Использовал прививки материала, взятого от больных оспой коров (осповакцины) для предупреждения заболеваний натуральной оспой среди людей. Вершиной всей научной деятельности Пастера и апофеозом торжества микробиологической науки стали исследования, закончившиеся в 1886 г. Изготовлением вакцины против бешенства. Хотя Пастеру не удалось обнаружить возбудителя бешенства у больных собак, он доказал, что последний находится в головном мозге больных животных. Из мозга зараженного бешенством кролика Пастер приготовил вакцину, которую случай помог ему испытать на мальчике, искусанном бешеном волком. Результат произошел все ожидания — мальчик остался жив.

В Париж из разных стран стали прибывать люди, искусанные бешеными животными. Они искали спасение в лаборатории Пастера, вследствие чего потребовались большие количества вакцин. Одной из первых стран, где было налажено производство антирабической вакцины по методу Пастера, оказалась Россия. В июне 1886 г. И.И.Мечников и Н.Ф.Гамалея организовали в Одессе лабораторию, в которой начали проводить прививки против бешенства. Эта лаборатория в честь Пастера была названа Патеровской станцией. Гениальные идеи и открытия Л.Пастера составили целую эпоху в биологии и медицине и нашли широкое практическое применение.

Он явился основоположником микробиологии как фундаментальной науки, так и основателем французской школы микробиологов, которая оказала существенное влияние на развитие микробиологии в других странах и прежде всего в России. Работы Р.Коха и их значение для микробиологии и инфекционной патологии.

1-введение в практику анилиновых красителей 2- использование в микроскопии иммерсионной системы и конденсора 3- разработка метода культивирования на биологических жидкостях и плотных питательных средах 4- разработка метода дробных пересевов 5- открытие возбудителя сибирской язвы, холеры, туберкулеза и туберкулина. Ученый РОБЕРТ КОХ (1843 — 1910). Кох начал свои исследования в то время, когда роль микроорганизмов в этиологии инфекционных заболеваний подвергалась серьезным сомнениям. Для ее доказательства требовались четкие критерии, которые были сформулированы Кохом и вошли в историю под названием «триады Генле — Коха». Суть триады заключалась в следующем: 1) предполагаемый микроб-возбудитель всегда должен обнаруживаться только при данном заболевании, не выделяться при других болезнях и от здоровых лиц; 2) микроб-возбудитель должен быть выделен в чистой культуре; 3) чистая культура данного микроба должна вызвать у экспериментальных зараженных животных заболевание с клинической и патологической картиной, аналогичной заболеванию человека. Практика показала, что все три пункта имеют относительное значение, поскольку далеко не всегда удается выделить возбудителя болезни в чистой культуре и вызвать у подопытных животных заболевание, свойственное человеку. Кроме того, болезнетворные микроорганизмы были найдены у здоровых людей, особенно после перенесенного заболевания.

Тем не менее на ранних этапах развития и формирования медицинской микробиологии, когда из организма больных выделяли многих микроорганизмов, не имеющих отношения к данной болезни, триада сыграла важную роль для установления истинного возбудителя заболевания. Исходя из своей концепции, Кох оканчательно доказал, что ранее обнаруженный у животных, больных сибирской язвой, микроорганизм отвечает требованиям триады и является истинным возбудителем данного заболевания. Попутно Кох установил способность сибиреязвенных бактерий образовывать споры. Велика роль Коха в разработке основных методов изучения микроорганизмов. Так, он ввел в микробиологическую практику метод выделения чистых культур бактерий на твердых питательных средах, впервые использовал анилиновые красители для окраски микробных клеток и применил для их микроскопического изучения иммерсионные объективы и микрофотографирование. Кох доказал, что выделенный им микроорганизм является возбудителем туберкулеза, который был впоследствии назван палочкой Коха.

Кох с сотрудниками выделил возбудителя холеры — холерный вибрион (вибрион Коха). Кох полностью посвящает свои исследования поискам средств, эффективных для лечения или профилактики туберкулеза. В ходе этих исследований им был получен первый противотуберкулезный препарат — туберкулин, представляющий собой вытяжку из культуры туберкулезных бактерий. Хотя туберкулин не обладает лечебным действием, его с успехом применяют для диагностики туберкулеза.

Научная деятельность Коха получила мировое признание, и в 1905 г. Ему была присуждена Нобелевская премия по медицине. Используя методы, разработанные Кохом, французские и немецкие бактериологи открыли многие бактерии, спирохеты, и простейшие — возбудители инфекционных болезней человека и животных. Среди них возбудители гнойных и раневых инфекций: стафилококки, стрептококки, клостридии анаэробной инфекции, кишечная палочка и возбудители кишечных инфекций (брюшнотифозная и паратифозные бактерии, дизентерийные бактерии Шига), возбудитель кровяной инфекции — спирохета возвратного тифа, возбудители респираторных и многих других инфекций, в том числе вызванных простейшими (плазмодии малярии, дизентирийная амеба, лейшмании). Этот период называют «золотым веком» микробиологии. Роль отечественных ученых в развитии микробиологической науки (И.И. Мечников, Д.И.

Ивановский, Г.Н. Габричевский, С.Н.

Виноградский, В.Д. Тимаков, Н.Ф. Гамалея, Л.А. Зильбер, П.Ф. Здродовский, З.В. Одним из основоположников иммунологии явился И.И.МЕЧНИКОВ (1845-1916) — создатель фагоцитарной, или клеточной, теории иммунитета.

Открытие И.И. Мечникова (1845-1916),сделанное им в Мессине в 1882 г.

При изучении реакции личинки морской звезды на введение в нее шипа розы. Это был тот счастливый случай, когда случайное наблюдение попало на подготовленный ум и привело И.И. Мечникова к созданию учения о фагоцитозе, воспалении и клеточном иммунитете. Вклад ПАУЛЯ ЭРЛИХА (1854-1915) в развитие иммунологии, -становление и развитие химиотерапии.

Этот ученый впервые сформулировал понятия об активном и пассивном иммунитете и явился автором всеобъемлющей теории гуморального иммунитета, в котором объяснялось как происхождение антител, так и их взаимодействие с антигенами. Открытия Эрлиха:1.

Использование в практике лечения малярии метиленового синего 2. Использование трипанового красного для лечения трипаносома 3. Открытие сальварсана (1907 г.) 4. Разработка метода определения активности антитоксических сывороток и изучение взаимодействия антиген-антитела 5. Теория гуморального иммунитета. Ознаменовался эпохальным открытием царства Vira.

Первым представителем этого царства явился вирус табачной мозаики, поражающий листья табака, открытый 12 февраля 1892 г. Сотрудником кафедры ботаники Петербургского университета Д.И.ИВАНОВСКИМ, вторым — вирус ящура, вызывающий одноименное заболевание у домашних животных, открытый в 1898 г. Ф.Леффлером и П.Фрошем.

Однако эти открытия не могли быть в то время по достоинству оценены и остались едва замеченными на фоне блестящих успехов бактериологии. Российский бактериолог Г.Н.ГАБРИЧЕВСКИЙ (1860-1907), который в 1895 г. Возглавил открытый на частные средства Бактериологический институт при Московском университете.

Он работал в области специфического лечения и профилактики скарлатины, возвратного тифа.Его стрептококковая теория происхождения скарлатины в конечном итоге завоевала всеобщее признание. Габричевский (1860-1907) ввел в России серотерапию, изучал механизмы невосприимчивости к возвратному тифу, дифтерии, скарлатине. С.Н.ВИНОГРАДСКИЙ, открыл серо- и железобактерии, нитрифицирующие бактерии — возбудители процесса нитрификации в почве. Он основал роль микроорганизмов в сельском хозяйстве. ТИМАКОВ(1905-1977) является одним из основателей учения о микоплазмах и L-формах бактерий, занимался генетикой микроорганизмов, бактериофагией, профилактикой инфекционных болезней.

Тимаков защищает кандидатскую диссертацию, посвященную профилактическим препаратам против кишечных инфекций. Одно из основных направлений научной деятельности В.Д. Тимакова посвящено генетике микроорганизмов. Тимаков считал необходимым использовать генетические пути анализа для решения медицински значимых микробиологических и эпидемиологических проблем. Выдающийся русский микробиолог Н.Ф.ГАМАЛЕЯ (1859-1949), который еще в 1886 г. Работал у Пастера по бешенству, совместно с Мечниковым и Бардахом основал первую в России бактериологическую станцию, где изготавливалась антирабическая вакцина и проводилась вакцинация людей против бешенства.

Н.Ф.Гамалея — автор многих научных работ, посвященных бешенству, холере и другим проблемам микробиологии и иммунологии. Л.А.ЗИЛЬБЕР (1894-1966) является основателем вирусной теории происхождения опухолей, выделил возбудителя дальневосточного клещевого энцефалита. ЗДРОДОВСКИЙ(1890-1976) занимался проблемой риккетси- озов, малярии, бруцеллеза и регуляции иммунитета. Зинаида Виссарионовна ЕРМОЛЬЕВА — создатель первого отечественного антибиотика. Из всех достижений научно-технического прогресса наибольшее значение для сохранения здоровья людей и увеличения продолжительности их жизни имеет, несомненно, открытие антибиотиков и в первую очередь пенициллина. Одним из важных направлений научной деятельности Зинаиды Виссарионовны является изучение холеры, новые методы лабораторной диагностики, лечения и профилактики холеры.

Значительную часть своей научной работы Зинаида Виссарионовна посвятила выделению и изучению веществ, оказывающих антибактериальное действие. Первое такое вещество под названием 'лизоцим' было выделено З. Ермольевой совместно с И.

Буяновской еще в 1929 г. Как показали результаты дальнейших исследований, лизоцим встречается во многих тканях, как животного, так и растительного происхождения. Группа ученых, возглавляемая З. Ермольевой, впервые в нашей стране получила противовирусный препарат интерферон. Этот препарат был применен впервые для лечения тяжелой формы гриппа в 1962 г.

И как профилактическое средство. Препарат применяется и в настоящее время для профилактики гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций, а также для лечения ряда вирусных заболеваний в глазной и кожной практик.Во время ВОВ (1942) З. Ермольевой и ее сотрудниками во Всесоюзном институте эпидемиологии и микробиологии был найден активный продуцент пенициллина и выделен первый отечественный пенициллин — крустозин. Открытие вирусов Д.И. Ивановским и его значение в возникновении и развитии вирусологии.

Этиологическая роль вирусов в патологии человека. История вирусологии началась в конце 19.

Первооткрывателем вирусов был Д. ИВАНОВСКИЙ (1892), который показал, что возбудитель мозаичной болезни табака способен проходить через фильтр, задерживающий самые мелкие бактерии, и не растёт на искусств. Питательных средах. Различил ранее смешиваемые так называемые рябуху, возбудителем которого является грибок, и мозаичную болезнь. Выяснил (1892), что возбудитель мозаичной болезни, в отличие от бактерий, невидим в микроскоп при самом сильном увеличении, проходит через фарфоровые фильтры и не растет на обычных питательных средах.

Обнаружил в клетках больных растений кристаллические включения («кристаллы Ивановского»), открыв, таким образом, особый мир возбудителей заболеваний небактериальной и непротозойной природы, названных впоследствии вирусами. Ивановский рассматривал их как мельчайшие живые организмы. Ивановский опубликовал работы об особенностях физиологических процессов в больных растениях, влиянии кислорода на спиртовое брожение у дрожжей, состоянии хлорофилла в растениях, его устойчивости к свету, значении каротина и ксантофилла, по почвенной микробиологии.

Д.И.Ивановский показал, что заболевание табака – табачная мозаика – может быть перенесено от больных растений к здоровым, если их заразить соком больных растений, предварительно пропущенным через специальный фильтр, задерживающий бактерии. Возбудитель мозаичной болезни называется Д. Ивановским то «фильтрующимися бактериями», то микроорганизмами, и это понятно, так как сформулировать сразу существование особого мира вирусов было весьма трудно. В 1898 году М. Бейеринк подтвердил данные Д.И.Ивановского и высказал гипотезу о том, что заболевание вызывается не бактерией, а принципиально новым, отличным от бактерий, инфекционным агентом. Он назвал его contagium vivum fluidum (жидкое заразное начало), другими словами – фильтрующийся вирус (термин «virus» - от лат. «яд», «ядовитое начало» - употребляли тогда для обозначения инфекционного начала любой болезни).

Ивановский работал в области почвенной микробиологии, физиологии и анатомии. Научная деятельность Ивановского сочеталась с педагогической: он был прекрасным лектором и педагогом, воспитавшим не одно поколение студентов Петербургского, Варшавского и Донского университетов. ЭТИОЛОГИЯ – учение о причинах и условиях возникновения и развития заболеваний и патологических процессов.

ЭТИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКТОР (ЭФ) – главный, ведущий, вызывающий фактор, без наличия которого не было бы заболевания (например, палочка Коха при туберкулезе). Этиологический фактор бывает простым (механическое воздействие) или комплексным (поражающие факторы ядерного взрыва), действующим длительно, в течение всего заболевания (микробы, вирусы, токсины), или только запускающим патологический процесс (тепловой фактор при ожоге). Предмет, задачи и разделы медицинской микробиологии. Методы применяемые в микробиологии.

Являются возбудителями инфекционных болезней. МИКРОБИОЛОГИЯ(греч.mikros — малый, лат.bios — жизнь) — наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, названные микроорганизмами, или микробами, их биологические признаки, систематика, экология, взаимоотношения с другими организмами, населяющими нашу планету, - животными, растениями и человеком. МИКРОБИОЛОГИЯ — наука, которая изучает микробы во всем многообразии их отношений с организмом человека. В процессе развития микробиологии были разработаны оригинальные методы исследования, многие заимствованы из других дисциплин — биофизики, биохимии, генетики, цитологии и т.д. За всю историю своего развития перед микробиологией так же, как и другими естественными науками, стояли определенные цели и задачи, успешное развитие которых способствовало научному и общественному прогрессу всего человечества. Это в свою очередь стимулировало развитие специализированных РАЗДЕЛЫ микробиологии: общая, техническая, с х, ветеринарная, медицинская, санитарная, морская, космическая микробиология.

ОБЩАЯ микробиология изучает наиболее общие закономерности, свойственные каждой группе перечисленных микроорганизмов: структуру, метаболизм, генетику, экологию и т.д. Основной задачей ТЕХНИЧЕСКОЙ (промышленной) микробиологииявляется разработка биотехнологии синтеза микроорганизмами биологически активных веществ: белков, витаминов, ферметов, спиртов, органических кислот, антибиотиков и др. СЕЛЬСКО ХОЗЯЙСТВЕННАЯ микробиология занимается изучением микроорганизмов, которые участвуют в круговороте веществ, используются для изготовления удобрений, вызывают заболевания растений, и другими проблемами. ВЕТЕРИНАРНАЯ микробиология изучает возбудителей заболеваний животных, разрабатывает методы их биологической диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения, направленного на уничтожение микробов-возбудителей в организме больного животного. Предметом изучения МЕДИЦИНСКОЙ микробиологииявляются болезнетворные (патогенные) и условно-патогенные для человека микроорганизмы, а также разработка методов микробиологической диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения вызываемых ими инфекционных заболеваний. Однако с медицинской микробиологией сформировалась иммунология, которая занимается изучением специфических механизмов защиты организмов людей и животных от болезнетворных микроорганизмов и другими проблемами. Предметом изучения САНИТАРНОЙ микробиологии, тесно связанной с медицинской и ветеринарной микрбиологией, является санитарно-микробиологическое состояние объектов окружающей среды, пищевых продуктов и напитков.

Морская и космическая микробиологияизучает соответственно микрофлору морей и водоемов и космического пространства и других планет. ЗАДАЧИ медицинской микробиологии: 1.

Установление этиологической (причинной) роли микроорганизмов в норме и патологии. Разработка методов диагностики, специфической профилактики и лечения инфекционных заболеваний, индикации (выявления) и индефикации (определения) возбудителей. 3.бактериологический и вирусологический контроль окружающей среды, продуктов питания, соблюдения режима стерилизации и надзор за источниками инфекции в лечебных и детских учреждениях. 4.контроль за чувствительностью микроорганизмов к антибиотикам и другим лечебным препаратам, состоянием микробиоценозов (микрофлорой) поверхностей и полостей тела человека. (1.изучение микроорганизмов; 2.патогенез действия микроорганизмов; 3.происхождение микроорганизмов).

Скачать игру сталкер петля времени с торрента бесплатно. Их путь пролегал под землёй в канализационных коллекторах.

Основные МЕТОДЫ микробиологии:микроскопический (фазово-контрастная, темнопольная, люминисцентная, электронная, окраска по Романовскому-Гимзе) — с использованием приборов для микроскопии. Определяет форму, размеры, взаиморасположение микроорганизмов, их структуру, способность окрашиваться определенными красителями. Микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический) — выделение чистой культуры и ее идентификация. Серологический (сыворотка) аллергологический биологический — заражение лабораторных животных с воспроизведением инфекционного процесса на чувствительных моделях (биопроба). Хемотоксонамический молекулярно-биологический ( ПЦР, ЛЦР, саузернблоттинг и нозенблоттинг, ДНК-ДНК- 8.

Методы микроскопии; с иммерсионным объективом, в темном поле, фазово-контрастная, люминесцентная микроскопия. Электронный микроскоп. Методы микроскопического исследования используют для изуче­ния формы и структуры клетки, подвижности микробов. Микроскопия в световом оптическом микроскопе.Световой микроскоп состоит из механической и оптической час­ти.

Механическая часть микроскопа - это штатив, состоящий из осно­вания и колонки, к которой прикреплены тубус и предметный столик. В колонке имеются две винтовые системы для установки тубуса. Оптическая часть микроскопа состоит из осветительного аппарата, объективов и окуляров. Осветительный аппарат расположен под предметным столиком.

В большинстве микроскопов свет отражается от зеркала и, пройдя через линзы конденсора, фокусируется в плоскости препарата. В сов­ременных микроскопах освещение достигается с помощью вмонтиро­ванного в микроскоп источника света. Объективы представляют собой систему линз в металлической оп­раве. Передняя (фронтальная) линза - самая маленькая. От нее глав­ным образом зависит увеличение микроскопа. Расположенные за ней линзы называются коррекционными, так как они предназначены для устранения недостатков оптического изображения.

При микро­скопии объектив погружают в каплю масла, поэтому объектив назы­вают иммерсионным (лат. Immercio - погружение), а масло - иммерси­онным маслом. Иммерсионный объектив требует особо осторожного обращения.

Фронтальная линза имеет настолько короткое фокусное расстояние до исследуемого объекта, что опускать объектив нужно медленно, глядя сбоку, чтобы не раздавить препарат, что связано с порчей линзы. Окуляры имеют две линзы: верхняя называется глазной г нижняя -собирательной. Окуляры обозначают по тому увеличению, которое они дают, например: х7, х10, х15.

Предел разрешения опти­ческого микроскопа равен 0,2 мкм. Микроскопия в темном поле.Для микроскопии в темном поле при­меняются особые конденсоры, у которых центральная часть линзы за­темнена, за исключением узкой полоски по периферии. Кроме того, боковые поверхности конденсора представляют собой не прямую ли­нию, а параболу. Внутренняя поверхность такого темнопольного па­раболоид-конденсора зеркальная. Лучи света попадают в темнопольный конденсор только через узкую полоску по периферии линзы. За­тем они отражаются от его зеркальной поверхности и, если в поле зре­ния нет никакого объекта, то ни один луч не попадает в объектив.

Поле зрения кажется совершенно черным. Если же в поле зрения есть какие-то объекты, например, микробы, то лучи, отраженные от них, попада­ют в объектив, и их можно видеть светящимися на темном фоне. Это явление подобно тому, которое наблюдается в комнате с за­темненными окнами, когда в косых лучах света, проникающих через щель, видны танцующие пылинки, при обычном освещении невидимые (феномен Тиндаля). За неимением специального темнопольного конденсора можно обычный конденсор превратить в темнопольный, поместив между его линзами кружок черной бумаги, немногим меньше по диаметру линзы конденсора.

В таком 'приспособленном' конденсоре можно наблю­дать достаточно ясно живых светящихся микробов, но поле зрения бу­дет не черным, а серым. Преимущество микроскопии в темном поле зрения состоит в том, что при этом можно видеть объекты более мелкие.

Кроме того, в тем­ном поле зрения лучше наблюдать в живом состоянии такие микробы, как лептоспиры, которые в водной среде не преломляют света и поэто­му в проходящем свете совершенно прозрачны. Фазовоконтрастная микроскопия.При прохождении через непроз­рачные объекты, такие как окрашенные препараты микроорганизмов, амплитуда световых волн уменьшается. Такие изменения, называемые амплитудными, улавливаются человеческим глазом. Поэтому ок­рашенные микробы видны в обычном микроскопе. Объекты, разные по плотности, но одинаковые по прозрачности, не меняют амплитуды световых волн, а только изменяют фазу.

Такие фазовые изменения человеческий глаз не способен уловить. Поэтому живые клетки микробов, их структурные элементы в живом состоянии прозрачны в проходящем свете и для нас невидимы. Фазовоконтрастный микроскоп превращает фазовые изменения в амплитудные. Поэтому структурные элементы с различной плотнос­тью выглядят как более светлые и более темные.

Это позволяет наблю­дать не только фазовые объекты целиком, но и структурные элементы микробов. Фазовоконтрастная микроскопия осуществляется с помощью обыч­ного светового микроскопа, в котором заменяют объективы и конден­сор на специальные - фазово-контрастные. Люминесцентная микроскопия.Люминесценция - это свечение объек­та за счет поглощенной световой энергии коротковолновой или ульт­рафиолетовой части спектра. Большинство м.о.

Не обла­дает собственной люминесценцией, поэтому пользуются наведенной люминесценцией путем обработки микробов флюорохромами. Чаще всего используют акридин-оранж, аурамин, изоцианат флюоресцеина, которые светятся под влиянием ультрафиолетовых лучей.

Некото­рые флюорохромы избирательно связываются с определенными структурами, такими, как ядро, цитоплазма, включения. Таким образом, можно дифференцировать эти структуры. Препараты, обработан­ные флюорохромами, микроскопируют в специальных люминесцент­ных микроскопах, в которых объекты исследуются в ультрафиолето­вых лучах. Люминесцентная микроскопия используется для реакции иммунофлюоресценции (РИФ). В этой реакции для определения вида мик­робов препарат-мазок из исследуемого материала обрабатывают спе­цифической антисывороткой, соединенной с флюорохромом. Если в материале содержатся микробы, соответствующие антисыворотке, то при микроскопии препарата в люминесцентном микроскопе наблюдается свечение микробов.

Электронная микроскопия.Возможности разрешающей способнос­ти светового микроскопа ограничены не качеством линз, а длиной вол­ны видимого света. В электронном микроскопе вместо световых лучей используется поток электронов. Источником электронов является рас­каленная вольфрамовая нить. Роль линз в электронном микроскопе выполняет круговое магнитное поле. Возникновение изображения на экране обусловлено тем, что различные части исследуемого объекта обладают неодинаковой про­ницаемостью для электронов. Электроноплотные участки выглядят тем­ными, электронопрозрачные - светлыми.

С помощью электронного микроскопа можно наблюдать вирусы, детали морфологии микробов. Используя метод иммуноэлектронной микроскопии (ИЭМ), можно видеть и сфотографировать вирусы с при­соединившимися к ним антителами.

9.Основные принципы систематики бактерий. Таксономические категории. Принципы классификации. Понятие о виде, критерии вида как основной таксономической единице. Подвид, инфравид (биовар, серовар, хемовар, фаговар), культура, популяция, штамм, клон (определение понятий).

Виды, связанные генетическим родством, объединяют в роды, роды — в семейства. Высшими таксономическими категориями являются царства и подцарства. Согласно современной систематике, патогенные (болезнетворные) бактерии относятся к надцарству прокариотов (Procaryotae), царству эукариот (Eucaryotae), грибы — к царству микота (Mycota), простейшие — к царству Protozoa, вирусы — к царству Vira. В основе современной систематики м.о. Лежат фенотипические признаки: морфологичеческие, физиологические, биохимические.

Морфологические характеризуют форму и структуру микробной клетки; физиологические — особенности роста микроорганизма на искусственных питательных средах в определенных условиях культивирования (температура, рН и др.), а также морфологию колоний на твердых средах и характер роста на жидкой среде; биохимические — тип окислительного и пластического метаболизма, ферментацию углеводов, протеолитические и другие признаки.

Здесь можно найти образцы любых учебных материалов, т.е. Получить помощь в написании уникальных курсовых работ, дипломов, лабораторных работ, контрольных работ и рефератов. Так же вы мажете самостоятельно повысить уникальность своей работы для прохождения проверки на плагиат всего за несколько минут. ЛИЧНЫЙ КАБИНЕТ Здравствуйте гость! Логин: Пароль: Запомнить Поиск готовой работы по сайту Предмет: Работа: Предлагаем нашим посетителям воспользоваться бесплатным программным обеспечением, которое позволит вам всего за несколько минут, выполнить повышение уникальности любого файла в формате MS Word. После такого повышения уникальности, ваша работа легко пройдете проверку в системах антиплагиат вуз, antiplagiat.ru, etxt.ru или advego.ru. Программа «StudentHelp» работает по уникальной технологии и при повышении уникальности не вставляет в текст скрытых символов, и даже если препод скопирует текст в блокнот – не увидит ни каких отличий от текста в Word файле.

Результат поиска Наименование: Шпаргалка Шпаргалка по 'Вирусологии' Информация: Тип работы: Шпаргалка. Добавлен: 26.02.14. Уникальность по antiplagiat.ru. Структура, размеры и форма вирусов позвоночных животных. Вирусы имеют черезвычайно малые размеры. Вирусы – это мельчайшие формы, значительно более мелкие, чем бактерии, и е два превышающие крупные молекулы.

Они находятся на границе или за пределами видимости в оптических микроскопах. Размеры их составляют тысячные доли микрона и весьма варьируют у разных вирусов: у мельчайших (ящур, полиомиелит) – около 10-25 нм, у средних (грипп, парагрипп и др.) – 100-120 нм, у крупных (оспа, орнитоз, трахома) – превышают 200нм.

Благодаря ничтожности размеров вирусы проходят через все мелкопористые бактериальные фильтры. Массу вирусов измеряют в дальтонах: 1 дальтон (Да) - это масса 1 атома водорода, которая равна 1,67.10 -24г. Размер вирусов измеряется в нанометрах (нм): 1нм = 10 -3мкм; 1нм = 10 ангстремам (Е). Вирусы имеют корпускулярную структуру и определенную для каждого вида морфологию, являясь неклеточной формой жизни. Вирусы имеют следующие основные морфологические (внешенее строение, вид) формы: палочковидная (длина до 250-300 нм, ширина 15 нм); сферическая или шарообразная (размеры до 150 нм) – вирусы гриппа, паротита, кори, лейкозов кур и мышей, папиллома кроликов, арбовирусы и др.; кубоидальная (у наиболее крупных)- вирусы оспы, эктромелии мышей и др.; головчатая, или сперматозоидная (вирусы бактерий); нитевидная (на некоторых стадиях развития гриппа). По данным электронноскопических, рентгенологических и химических исследований центральная часть вируса (нуклеоид или нуклеокапсид) представляет собой нуклеиновую кислоту, упакованную в оболочку (капсиду), образованную из белковых спирализованных нитей или свернувшихся в клубок шаровидных субъединиц – капсомер (греч. Capsa – коробка).

Капсида состоит из определенного для данного семейства и вида вируса капсомеров, расположенных в ней в определенном порядке и видимых в электронном микроскопе. В зависимости от укладки капсомеров в капсиде вирусы делят на три группы: 1) вирусы, обладающие спиральной симметрией; 2) вирусы, обладающие икосаэдрической симметрией; 3) вирусы имеющие комбинированную симметрию. Основные компоненты вирусов – белки и нуклеиновые кислоты. Сложные по структуре вирусы содержат еще липиды и углеводы, и некоторые из них – ферменты. В зависимости от вида вируса содержание каждого компонента достигает больших различий.

Так, количество белка колеблется от 50 до 90%, нуклеиновой кислоты – от 1 до 40, углеводов от 0 до 22, липидов – от 0 до 50% и более. Охарактеризуйте субъединичные (молекулярные) вакцины, чем они отличаются от обычных вакцин? Субъединичные вакцины содержат в своем составе только протективный (защитный) антиген, против которого в организме вырабатываются вируснейтрализующие антитела. При ряде инфекций (болезнь Марека) субъединичные вакцины готовят из вирусспецифических гликопротеидов клеточных мембран.

Для создания субъединичных вакцин используют три метода. Первый метод – получение большого количества вирусов, очистка и выделение иммуногеных субъединиц; это так называемые сплит-вакцины. Однако этот способ является дорогостоящим, и он вряд ли найдет когда-либо промышленное применение. Второй метод – химический синтез специфического иммуногена. При его использовании необходимо знание структуры и аминокислотного состава антигенных детерминант. Детерминантные участки, которые включают в себя только несколько аминокислот, могут быть синтезированы химически и соединены с белком-носителем, таким, как бычий сывороточный fm,evby$ затем сцепленный белок используют в качестве вакцины.

К сожалению, это требует технологически сложного пептидного синтеза. Третий метод - рекомбинативный.

Рекомбинативные вакцины получают с помощью биотехнологии. Их изготовление – новое направление в создании генно-инженерных противовирусных вакцин, суть которого состоит во введении в геном крупных вирусов генов протективных белков (противовирусных). В качестве продуцента протективного антигена вируса наиболее часто используют кишечную палочку. В плазмиду кишечной палочки «встраивают» ген вируса, ответственный за синтез протективного антигена.

Полученную кишечную палочку культивируют в реакторах, которые синтезируют полипептид вируса. Из бактериальной культуры полипептид вируса выделяют методом молекулярной биологии.

Субединичные вакцины обладают значительными преимуществами по сравнению с традиционными препаратами: они безопасны, так как не содержат вируса, способного вызвать заражение, свободны от вредных примесей, стабильны и не требуют хранения в рефрижераторах. Однако сегодня их главный недостаток – слабые иммуногенные свойства.

Для этой целиведется поиск новых адъютантов и иммуностимуляторов. Принцип и практическое использование РН в вирусологии.

Основными составляющими компонентами этой реакции являются: иммунная вируснейтрализующая (опытная) и нормальная (контрольная) сыворотки одного и того же вида животного или человека; содержащий живые вирусы материал, являющийся антигеном; биологические объекты (мыши, куриные эмбрионы), на которых обнаруживают вируснейтрализующее действие иммунной сыворотки. Применяют два варианта постановки реакции нейтрализации. При одном из них берут постоянную дозу сыворотки и различные разведения вируса, при втором – постоянное разведение вируса и различные разведения сыворотки. Во всех случаях последовательность проведения реакции следующая: предварительный контакт вируссодержащего материала с соответствующей иммунной сывороткой (один из этих компонентов заведомо известен, наличие другого определяется); введение этой смеси в чувствительную биологическую систему (белым мышам или куриным эмбрионам); учёт наличия или отсутствия нейтрализации. Сыворотки получают либо от больных людей, либо применяют диагностические сыворотки от иммунизированных животных.

Перед постановкой реакции сыворотки инактивируют, прогревая при температуре 56-60 0С. Антигены (вируссодержащие взвеси) получают из материала от больных вирусными инфекциями, готовят из органов и тканей заражённых вирусом животных, куриных эмбрионов, а также из инфицированных клеточных культур и подвергают очистке. Перед употреблением антиген титруют для определения его активности. Биологические объекты выбирают с учётом свойств вируса, чувствительности самого объекта к действию вируса, а также задач и условий исследования.

Постановка реакции нейтрализации (I вариант) Ставят для идентификации выделенного вируса. Для постановки реакции берут два ряда пробирок, из которых первый ряд является опытным, а второй – контрольным. В первый ряд пробирок наливают определённое количество неразведённой диагностической иммунной сыворотки, во второй – контрольный – такое же количество неразведённой нормальной сыворотки того же вида животного. Отдельно в пробирках готовят несколько разведений вируса, чтобы при добавлении их в пробирки опытного, контрольного ряда получились последовательные 10-кратные разведения вируса (например, 10 -1, 10 -2, 10 -3 и т.д.). Сыворотки и добавляемые разведения вируса должны быть в одинаковых объёмах, например по 0,2 мл. Пробирки с приготовленной смесью ставят в термостат при температуре 37 0С обычно на 1-2 часа. После этого опытные и контрольные смеси вводят мышам или в куриные эмбрионы.

Каждым разведением для достоверности опыта заражают не менее 4 мышей или куриных эмбрионов. За заражёнными животными ( опытными и контрольными) устанавливают наблюдение в течение 2-х недель, регистрируют заболевших и погибших мышей. Учёт реакции проводят путём сопоставления количества погибших опытных и контрольных мышей от соответствующего разведения вируса. Определяют 50%-ную смертельную дозу – LD 50, проводя подсчёт по Риду и Менчу. Высчитывают индеек нейтрализации (ИН) по формуле, определяющей количество доз, нейтрализуемых сывороткой: Титр вируса в опыте с нормальной сывороткой ИН = - - - Титр вируса в опыте с иммунной сывороткой ИН менее 10 – отрицательный; ИН – 11-49 – сомнительный; ИН равный 50 и выше – положительный. Заражённые эмбрионы инкубируют при температуре 35-37 0С от 48 до 72 ч.

Затем яйца вскрывают, аллантоисную или амниотическую жидкость отсасывают и в ней определяют наличие вируса при помощи реакции гемагглютинации. Если гемагглютинация наступила в контроле (смесь нормальной сыворотки с разведениями вируса) и отсутствует в опыте (смесь иммунной сыворотки с разведениями вируса), то сыворотка обладает нейтрализующим действием, Конечный титр вируса в контроле и в опыте определяют путём статистической обработки. Постановка реакции нейтрализации (II вариант) Реакцию ставят с различными разведениями исследуемой сыворотки и постоянной дозой известного живого вируса.

Для этого к двукратным возрастающим разведениям сыворотки добавляют равные объёмы определённого разведения вируса (рекомендуется брать 100 или 1000 LD 50 вируса). Далее поступают как и в I варианте, то есть выдерживают опытные и контрольные смеси 1-2 часа в термостате, после чего вводят их мышам или куриным эмбрионам. При постановке реакции нейтрализации на мышах за титр изучаемой сыворотки принимают разведение, дающее защитный эффект у 50% мышей. В реакции на куриных эмбрионах титром сыворотки считается то наибольшее её разведение, которое ещё способно задержать гемагглютинирующее действие вирусов у 50% заражённых куриных эмбрионов. Как осуществляется поддержание вирусных штаммов в лабораторных условиях (пассажи, консервация)?

Пассаж вируса, проведение микроба (resp. Вируса) через организм восприимчивого животного с целью усиления вирулентности; метод впервые предложен Пастером. Животное заражается микробом; затем его убивают или оно гибнет, и из его органов выделяют чистую культуру, вновь заражая ею новое животное и повторяя эту процедуру любое число раз. Можно пассировать также органы, заражая животное культурой микроба и вводя новым животным эмульсию органов зараженного. Чистая культура выделяется только после известного числа пассажей. Метод размножения вирусов в культурах клеток: Культура клеток - это клетки многоклеточного организма, живущие и размножающиеся в искусственных условиях вне организма (in vitro). Методика культивирования клеток особенно успешно стала развиваться после 40-х годов текущего столетия.

Этому способствовали следующие обстоятельства: открытие антибиотиков, предотвращающих бактериальное заражение культур клеток, открытие Хуангом (1943) и Эндерсом (1949) способности вирусов вызывать специфическую деструкцию клеток (цитопатический эффект) - удобный метод индикации вирусов в культурах клеток, и, наконец, Дульбекко и Фогт (1952) предложили методику трипсинизации тканей и?получения однослойных культур клеток. В вирусологической практике применяют следующие культуры клеток: первично-трипсинизированные культуры клеток - клетки, полученные непосредственно из органов или тканей организма, растущие in vitro в один слой. Культуру клеток можно получить практически из любого органа или ткани человека или животного (взрослого или эмбриона). Однако лучше это удается сделать из эмбриональных органов, так как клетки эмбрионов обладают более высокой потенцией роста.

Чаще всего для этих целей используют почки, легкие, кожу, тимус, тестикулы эмбрионов или молодых животных. Для получения первичных клеток от здорового животного не позднее 2-3 ч после убоя берут соответствующие органы или ткани, измельчают их на кусочки (1-4 мм) и обрабатывают ферментами: трипсином, панкреатином, коллагеназой и другими (чаще трипсином).

Ферменты разрушают межклеточные вещества, полученные при этом отдельные клетки суспендируют в питательной среде и культивируют на внутренней поверхности пробирок или матрасов в термостате при 37°С. Клетки прикрепляются к стеклу и начинают делиться. В развитии культур клеток различают несколько фаз: адаптации, логарифмического роста, стационарную и старения (гибель клеток).

Размножаясь, клетки размещаются на поверхности стекла и при полном покрытии его в один слой контактируют друг с другом и прекращают делиться (контактная ингибиция). На стекле формируется слой толщиной в одну клетку (поэтому эти культуры клеток называют однослойными или монослойными).

Монослой сохраняет жизнеспособность в течение 7-21 дней. Для культивирования вирусов используют молодые культуры клеток (как только сформировался монослой).

В вирусологической практике часто используют субкультуры, которые получают из первичных клеток, выращенных в матрасах, путем снятия их со стекла раствором версена или трипсина, ресуспендирования в новой питательной среде и пересева на новые матрасы или пробирки. Через 2-3 суток формируется монослой.

Практически субкультуру можно получить из всех первичных культур клеток. (Хуже субкультивируются куриные фибробласты.) Субкультуры по чувствительности к вирусам не уступают первичным культурам клеток, кроме того, они более экономичны, и есть возможность выявления контаминации клеток вирусами. Субкультуры получают от 2-5 пассажей (перевивок) и очень редко до 8-10. Последующие пассажи приводят к изменению морфологии клеток и их гибели. Если клеточные культуры прошли более 10 пассажей, они уже на стадии перехода к перевиваемым культурам клеток. Перевиваемые культуры клеток - это клетки, способные к размножению вне организма неопределенно длительное время.

В лабораториях их поддерживают путем пересевов из одного сосуда в другой (при условии замены питательной среды). Получают перевиваемые клетки из первичных культур клеток с повышенной активностью роста путем длительных пересевов в определенном режиме культивирования. Обычно работа по получению новых клеточных линий продолжается несколько месяцев. Полагают, что механизм происхождения перевиваемых культур клеток - результат генетической изменчивости клеток или селекции единичных клеток, присутствующих в первичной исходной культуре.

Клетки перевиваемых культур имеют одинаковую форму, гетероплоидный набор хромосом (у первичных клеток он диплоидпый), стабильны в условиях роста in vitro, некоторые из них обладают онкогенной активностью. Последнее свойство ограничивает использование перевиваемых культур клеток для культивирования вирусов при производстве вакцин. Перевиваемые культуры клеток можно получать как из здоровых тканей животных, так и из опухолевых. Перевиваемые клетки имеют преимущества перед первичными: их приготовление значительно проще, экономятся труд и материальные средства; эти культуры заранее можно проверить на наличие латентных вирусов и микрофлоры; клональные линии обеспечивают более стандартные условия для размножения вирусов, чем первичные, представляющие смешанную популяцию клеток.

Большинство перевиваемых клеток обладает более широким спектром чувствительности к вирусам, чем соответствующие первичные культуры. Поддерживают перевиваемые клетки путем периодических пересевов.

Чаще используют бесцентрифужный метод. Для очередного пересева отбирают 2-3-дневную культуру с хорошим монослоем. Диплоидные культуры клеток.

Это морфологически однородная популяция клеток, стабилизированная в процессе культивирования in vitro, имеющая ограниченный срок жизни, характеризующаяся в процессе пассирования кариотипом, свойственным исходной ткани, свободная от контаминантов и не обладающая туморагенной активностью при трансплантации хомячкам. Диплоидные культуры клеток, так же как и перевиваемые, получают из первичных культур клеток. Кариотип клеток очень лабилен и при обычных методах культивирования клеток он изменяется в первые дни. Поэтому потребовались специальные методы обработки ткани, питательные среды высокого качества, фетальная сыворотка для длительного поддерживания клеток in vitro в диплоидном состоянии. Диплоидные клетки получают из различных тканей эмбриона человека (легкие, почки, кожно-мышечная ткань, сердце и др.) и животных (почки эмбриона крупного рогатого скота, свиней, почки хомяка). Диплоидные клетки в отличие от перевиваемых имеют ограниченные возможности пассирования. Максимальное число пассажей 50 ± 10, затем количество делящихся клеток резко уменьшается и они гибнут.

Однако диплоидные клетки могут быть использованы в течение длительного времени, так как при каждом пассаже часть клеток можно заморозить (-196°С) и при необходимости восстановить. Диплоидные клетки имеют преимущества перед перевиваемыми и первичными клетками: 10-12 дней они могут быть в жизнеспособном состоянии без смены питательной среды; при смене среды один раз в неделю остаются жизнеспособными в течение 4 недель; особенно пригодны для длительного культивирования вирусов, у них сохранена чувствительность исходной ткани к вирусам.

Суспензионные культуры клеток. Оуэне с сотрудниками показали способность клеток размножаться в свободносуспендированном состоянии. В последующие годы этот метод был значительно усовершенствован: была создана современная аппаратура, обеспечивающая размножение клеток со строго заданными параметрами (температура, рН, скорость перемешивания), а также адаптированы многие линии перевиваемых клеток к размножению в этих условиях. Выращивание вирусов в суспензионных культурах клеток открывает большие возможности в промышленном производстве вакцин и диагностикумов. Однако только перевиваемые клетки хорошо культивируются в суспензии. Новый подход к культивированию клеток в суспензии - применение микроносителей (сефадекс, силикагель, цитолар и др.). На микроносителях культивируемые клетки формируют монослой.

Таким образом, этот способ позволяет методами суспензионного культивирования выращивать зависимые от прикрепления к твердому субстрату клетки: первичные, субкультуры, диплоидные. Эти клетки принято называть поверхностно зависимыми. Способ культивирования на микроносителях в настоящее время чрезвычайно популярен, так как он открывает большие перспективы в клеточной биотехнологии, в получении вакцин и других биологически активных веществ (интерферон, гормоны и т.д.). Хранение культур клеток. Каждый из трех основных типов клеточных культур - первичных культур, диплоидных штаммов и перевиваемых линий клеток, используемых в вирусологических исследованиях, часто приходится консервировать, так как при продолжительном пассировании клеток in vitro есть опасность бактериального загрязнения и неконтролируемых (генетических) изменений самих клеток.

Выделенные изоляты, как и штаммы стандартных вирусов, необходимые для сравнения и серологических исследований, следует хранить в условиях, обеспечивающих им максимально длительную жизнеспособность. При рН среды 7,0-7,4 и внесении в нее определенных добавок вирус можно хранить при 4° в течение нескольких недель, а некоторые виды - в течение года без потери инфекционных свойств. Многие вещества обладают консервирующим или защитным свойством по отношению к вирусам. Чаще всего используют глицерин, который обладает бактериостатическим действием, но в то же время и защищает вирусы. Его применяют в качестве добавок к вируссодержащему материалу в количестве 10-40%. Довольно широко применяется также фенол, который в концентрации 0,2-0,5% большинство вирусов не инактивирует (например, вирусы чумы свиней, болезни Ауэски, ящура).

Для консервирования вирусов можно использовать 5-20%-ный раствор NaCI, 10%-ный раствор глицерина, 0,15 M раствор KCI. Стабильность вирусов значительно увеличивается в результате добавления 1-10% глюкозы, сахарозы или мальтозы, 10-50% сыворотки или сывороточного альбумина, 10-50% обезжиренного молока, 0,1-2,0% желатина. Чем меньше белка в вируссодержащей взвеси, тем меньше его стабильность. Поэтому очищенные вирусы быстро теряют свою биологическую активность. При хранении вирусов целесообразно также использовать полимеры: 0,5-3%-ную метилцеллюлозу или 0,1-2%-ный поливиниловый спирт. Хорошим стабилизирующим действием на некоторые вирусы обладает 5%-ный ДМСО (диметилсульфоксид), проявляющий при этом и антибактериальные свойства.

Вирусы в культуральной жидкости стабилизируются компонентами питательной среды (сыворотка, гидролизат и др.). Таким образом, большинство вирусов можно сохранять при температуре 4 oС в течение нескольких недель и даже нескольких лет при условии добавления указанных выше компонентов-стабилизаторов. Однако известно, чем ниже температуры замораживания вируса, тем дольше сохраняется его жизнеспособность.

При быстром замораживании небольших количества вируса до минус 190°С с последующим хранением при этой температуре практически не снижается титр вируса. Такая температура, однако, очень редко используется в диагностической работе. В лабораториях хорошие результаты дает сохранение вирусов при температуре минус 70°С. Использование стабилизирующих веществ необходимо не только при хранении вируса, но и для предотвращения потерь его в процессе самого замораживания, особенно вируссодержащих образцов экстраэмбриональной и культуральной жидкости. Если же в культуральной питательной среде содержится 2-19% сыворотки или гидролизата лактальбумина, то ее можно заморозить без добавления стабилизирующих веществ.

Хорошее защитное действие при замораживании вирусов и хранении их в таком состоянии оказывает добавление к вируссодержащему материалу одного из таких компонентов, как 10-30% сыворотки крови, инактивированной при 56-60°С; 0,5-1,5% желатина; 20-50% обезжиренного молока; 0,1-0,5% 59. Аденовирусная инфекция крупного рогатого скота. Аденовирусная инфекция крупного рогатого скота (аденовирусная пневмония телят, аденовирусный пневмоэнтерит телят) (adenoviridae infection) — остро протекающее заболевание молодняка сельскохозяйственных животных, характеризующееся поражением органов дыхания, пищеварения, лимфоидной ткани, конъюнктивитами.

Шпаргалки По Ветеринарной Вирусологии

Крупный рогатый скот часто является носителем латентных аденовирусов, вызывающих бессимптомные инфекции. Систематическое положение вируса. Возбудителем аденовирусной инфекции является ДНК-геномный вирус, принадлежащий к семейству Adenoviridae, роду Mastadenovirus. Вирусные частицы имеют форму икосаэдра, размер — от 73 до 87 нм, суперкапсида отсутствует. В настоящее время известно 32 типа аденовирусов человека, 25 типов — крупного рогатого скота, 4 типа — овец, по 2 типа аденовирусов собак и мышей, 8 типов кур. Штаммы аденовирусов крупного рогатого скота 1-го, 2-го и 3-го серотипов имеют общий комплементсвязывающий антиген, отличающийся от антигена типов 4, 5, 6. На основании этих свойств аденовирусы к.р.с.

Делят на 2 антигенные подгруппы. Аденовирусы первой подгруппы более близки по биологическим свойствам к аденовирусам человека. Отдельные серотипы аденовирусов обладают онкогенными свойствами. Аденовирусы в зависимости от серотипа вызывают гемагглютинацию эритроцитов белых крыс (1-й и 2-й серотипы), белых мышей (2-й серотип), обезьян.

Эпизоотологические данные. В естественных условиях аденовирусной инфекцией чаще заражаются телята в возрасте от 2-недель до 4-мес., а также поросята, ягнята, цыплята, жеребята, щенята собак, лисиц, песцов. Установлена повышенная чувствительность к аденовирусной инфекции у жеребят арабских пород. Источником возбудителя инфекции являются больные животные, выделяющие вирус с носовыми истечениями и фекалиями. Заражение происходит аэрогенным и алиментарным путями, через конъюнктиву глаз, при непосредственном контакте. Факторами передачи служат загрязненные выделениями больных животных, корм, вода, воздух, подстилка, инвентарь и др.

Клиническая картина. У взрослых животных аденовирусная инфекция протекает латентно, сопровождаясь длительным вирусоносительством.

У молодняка болезнь проявляется спорадически или в виде энзоотических вспышек. У телят и поросят эта болезнь может перейти в опустошительную эпизоотию с острым течением, массовыми пневмониями, высокой летальностью.

Отмечены случаи осложнений аденовирусной инфекции микоплазмами, бактериальной микрофлорой и другими вирусами. Отмечена взаимосвязь течения аденовирусной инфекции крупного рогатого скота с лейкозом. При обследовании коров из неблагополучных по лейкозу хозяйств установлено, что серопозитивные коровы на 100% инфицированы аденовирусами. Течение и симптомы. Инкубационный период у телят составляет 3-4 суток.

Течение болезни у молодняка острое, в более старшем возрасте возможно и хроническое. У телят устанавливают повышение температуры до 41,5°С, отказ от корма, вначале серозное, а затем слизисто-гнойное истечение из носа, слезотечение, кашель, затрудненное дыхание и понос. Особенно тяжело болезнь протекает среди телят 15—20-суточного возраста, у которых выявляют понос с примесью крови и слизи, сильное угнетение, дегидратацию организма, гибель 50—60% больных за 1—3 суток болезни.

У телят более старшего возраста отмечают кашель, поносы, истощение, отставание в росте и развитии. Патологоанатомические признаки. Признаки гемморагического катарального гастроэнтерита, расстройства циркуляции крови. Изменения органов дыхания: уплотнения, ателектаз и эмфизема, пневмония легких. Строение и размеры вирионов. Вирус,содержит ДНК, белковая оболочка состоит из 252 капсомеров кубической укладки, размеры - 70-90 нм.

Аденовирусы устойивы к физико-химическому воздействию, трипсину, эфиру, хлороформу и 50%-ному этиловому спирту, к изменению рН среды. Прогревание при 56°С приводит к полной инактивации через 30 минут. Ультрафиолетовое излучение инактивирует его за 30-60 мин. Антигенные свойства. Аденовирус крупного рогатого скота представлены девятью серологическими типами.

Вирус содержит три растворимых антигена: А, В, С. Антиген А является группоспецифичным, В – белковый компонент 9токсический фактор, вызывающий цитопатогенное действие), С – типоспецифичный. Антигены А и С вызывают образование вируснейтрализующих, комплементсвязывающих, пеципитирующих и антигемагглюттинирующих антител. Диагноз на аденовирусную инфекцию ставят комплексно на основании клинико-эпизоотологических данных, патологоанатомических изменений и лабораторных исследований. Лабораторная диагностика Патологический материал: прижизненно – кровь, смывы со слизистой оболочки носовой полости, прямой кишки, с конъюнктивы;от трупов – кусочки легких и бронхов. Селезенки, лимфоузлов, миндалины, пораженные участки слизистых оболочек носовой и ротовой полостей, трахеи и желудочно-кишечного тракта. Схема лабораторной диагностики.?

Шпоры По Ветеринарной Вирусологии

Экспресс-методы: реакция иммунофлуорисценции (РИФ), реакция гемагглютинации (РГА), обнаружение телец-включений.?? Вирусологические исследования: 1) выделение вируса в культуре клеток текстул бычка, ПЭК или ЛЭК; 2)идентификация выделенного вируса в реакция иммунофлуорисценции (РИФ), реакции связывания комплимента (РСК), реакции диффузной преципитации(РДП), реакции нейтрализации(РН), иммуноферментном анализе (ИФА).???Ретроспективная диагностика: реакция непрямой гемагглютинации(РНГА), реакция связывания комплемента (РСК), реакции диффузной преципитации(РДП), реакция торможения гемагглютинации(РТГА) Дифференциальный диагноз.

Аденовирусную инфекцию, дифференцируют от инфекционного ринотрахеита, респираторно-синтициальной инфекции, вирусной диареи, парагриппа-3, хламидиоза, пастереллеза. Для специфической профилактики используют инактивированные вакцины из двух штаммов двух серологических групп аденовирусов. Поствакцинальный иммунитет у телят – до 123-127 суток. Ветеринарная вирусология / В.Н. Белоусова, Н.В. – М.: Колос, 1984.

Госманов Р.Г., Колычев Н.М., Плешакова В. /Ветеринарная вирусология: учебник.

3-е изд., перераб и доп. – Спб.: Издательство «Лань», 2010. (+ вклейка, 8 с.). – (учебник для вузов. Специальная литература). Коротенко Н.В., Смиян Ю.П, Адаменко А.П.

И др./ Справочник специалиста ветеринарной лаборатории; под ред. – Киев: Урожай, 1987. Kmbvi/kmbvi29.doc Учебный портал РУДН. Local/disc/?id=3571&rasdid= 44602&v=2260 Содержание. Структура, размеры и форма вирусов позвоночных животных.

Охарактеризуйте субъединичные (молекулярные) вакцины, чем они отличаются от обычных вакцин? Принцип и практическое использование РНГА в вирусологии. Как осуществляется поддержание вирусных штаммов в лабораторных условиях (пассажи, консервация)? Аденовирусная инфекция крупного рогатого скота.

ФГБОУ ВПО «Омский государственный аграрный институт им. Столыпина» Институт ветеринарной медицины. Кафедра вирусологии, микробиологии, иммунологии. Контрольная работа по дисциплине «Ветеринарная вирусология». Вариант № 20 Омск 2013 и т.д.

Примечание. Уникальность работы указана на дату публикации, текущее значение может отличаться от указанного.